CF633 PHA-E,CF633标记菜豆凝集素E,可应用于远红荧光显微镜成像 szthrk.cn

产品介绍

CF633 PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E,与CF633荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性远红低串扰区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性,对该类特殊糖链修饰具有优异的选择性,同时依托CF633染料优化的远红荧光骨架,兼具高光稳定性与极低多色通道串扰的特点,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析彻底去除未反应的游离染料,解决了传统同波段标记凝集素多色成像时信号重叠度高、背景偏高的痛点。试剂为蓝紫色至深紫色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性优异,完全无染料聚集现象,是远红低串扰区开展菜豆凝集素靶向糖链多色共标研究的标杆级专用工具。

基础参数

中文名称:CF633标记菜豆凝集素E,CF633-外源凝集素(菜豆)

英文名称:CF633 PHA-E,CF633-PHA-E,CF633-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态:蓝紫色至深紫色冻干粉

荧光光谱参数:最大激发波长约633 nm,发射波长约668 nm,与633 nm氦氖激光器、640 nm半导体激光器完全适配

储存条件:-20℃避光密封干燥长期保存,避免反复冻融;复溶后建议分装为单次使用量,4℃避光短期可稳定存放,操作全程严格避光,防止光照导致荧光猝灭

用途:β-1,6-分支N-连接寡糖远红低串扰区荧光标记,多色共标实验低串扰成像,远红区流式细胞术检测

作用机理

CF633 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。CF633荧光基团通过酰胺键锚定在PHA-E亚基表面,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在633nm波长激发下,偶联在蛋白上的CF633基团可发射出明亮的668nm远红荧光,该波段与FITC、TRITC等常规荧光素几乎没有光谱重叠,通道串扰极低,直接将凝集素的糖链识别事件转化为独立的低串扰特征荧光信号。

核心产品优势

CF633 PHA-E的核心差异化优势集中在远红低串扰区的多色成像适配性上,相比传统同波段的其他荧光染料标记凝集素,CF633染料的激发与发射波长均落在630–670 nm区间,与常用绿光、橙光荧光探针的光谱重叠度极低,多色共标实验中几乎不会产生信号串扰,大幅降低光谱拆分难度。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于1%,非特异性吸附极低,同时其光稳定性优异,在633 nm激光连续采集下信号衰减缓慢,完全支持同一批样本的多轮重复检测,是远红低串扰区开展β-1,6-分支N-连接寡糖多色共标研究的标杆级专用工具。

应用领域

CF633 PHA-E可用于流式细胞分选与糖型鉴定,作为远红区凝集素探针检测细胞表面靶标糖链的表达水平,辅助免疫分型研究,实现低串扰的多参数流式分析。该试剂可应用于远红荧光显微镜成像,固定细胞或组织切片经试剂孵育后,633 nm激光激发下观察细胞膜糖萼中特定糖链的亚细胞定位,远红发射窗口与绿色通道标记互不干扰。同时它也适用于糖生物学机制解析,作为工具凝集素研究菜豆凝集素家族中E亚型对特定糖链修饰的识别特异性及结合动力学,为糖结构-功能关系提供实验依据,为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的标杆级工具。

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