远红荧光核蛋白探针：Cy5 Histone 光谱特征、标记工艺与染色质单分子研究探究(原核蛋白表达系统)|科技 |分子 |光谱 |核蛋白 |荧光 |标记

远红荧光核蛋白探针：Cy5 Histone 光谱特征、标记工艺与染色质单分子研究探究(原核蛋白表达系统) szthrk.cn

第一段：产品基本信息

产品名称：Cy5 Histone，中文全称 Cy5 标记组蛋白，英文全称 Cy5-labeled Histone，简称 Cy5 - 组蛋白 CAS 号：组蛋白为重组蛋白无单一 CAS；Cy5 母染料 CAS：146368-11-8；整体属于蛋白 - 染料共轭物，无统一分子式物理化学性质：外观为白色至淡紫红色冻干粉末，复溶后呈淡红色澄清蛋白溶液；溶解性方面，可溶于蛋白缓冲液、PBS、HEPES 等水相缓冲体系，高浓度有机溶剂易造成蛋白变性沉淀；无明确单点熔点，温度高于 180 ℃蛋白骨架逐步热分解；光谱特征：激发峰 646 nm 附近，发射峰 664 nm 附近，远红光区间，生物自发荧光低；由 Cy5 花青染料共价偶联至组蛋白（H2A/H2B/H3/H4/H1 等亚型，按需定制），标记方式分为氨基 NHS 酯标记或定点巯基马来酰亚胺标记；保留组蛋白折叠结构与 DNA 结合能力，可组装形成核小体；中性、低盐避光条件稳定，极端 pH、高温、高尿素环境会造成蛋白解折叠、染料脱落；长时间强光照射会引发 Cy5 光漂白，荧光衰减。

产地：西安齐岳生物可提供

包装：mg以及g级

纯度标准：≥95%（高纯级）

第二段：合成路径与使用方法

合成路径：以高纯度重组组蛋白单体或组蛋白八聚体为原料，置换至适配标记缓冲液；选用 Cy5 NHS 酯或 Cy5 马来酰亚胺，避光条件下进行共价偶联；氨基标记常用 pH 8.0–8.3 碳酸氢钠缓冲；定点巯基标记选用 pH 7.0 左右含 TCEP 的无胺缓冲；反应结束后通过凝胶排阻色谱、超滤除去游离 Cy5 染料；收集蛋白组分，换液至储存缓冲液，无菌过滤后冷冻干燥、避光分装；全程控温避光，防止蛋白变性与染料漂白。常规使用方法：干粉使用前用无还原剂的蛋白缓冲液轻柔复溶，常规工作浓度 0.1–10 μM；可直接用于体外核小体重组，和 DNA 共孵育组装荧光标记核小体；可用于单分子 TIRF、FRET 体系，搭配 Cy3 标记 DNA 构建双色 FRET 探针；可开展染色质组装、组蛋白置换、分子伴侣结合实验；产物纯度、标记效率可通过 SDS-PAGE 荧光扫描、紫外吸收、质谱表征；操作尽量避光，避免反复冻融；含游离巯基的缓冲体系会破坏马来酰亚胺偶联产物。

第三段：应用领域

染色质体外重构研究，制备荧光标记核小体，观测核小体组装、解聚、滑移行为。
单分子荧光与 FRET 检测，用于核小体构象动态、DNA 解缠绕、组蛋白交换动力学测试。
表观生化研究底物，用于组蛋白修饰、染色质重塑酶、组蛋白分子伴侣互作实验。
荧光成像示踪试剂，固定细胞内染色质可视化、核蛋白共定位、共聚焦成像。
凝胶电泳荧光检测标样，用于蛋白电泳、毛细管电泳荧光通道参数调试。
生物分子识别研究样本，探究转录因子、DNA 修复蛋白与核小体的结合规律。
核蛋白界面化学探究，用于蛋白 - DNA、蛋白 - 蛋白相互作用的荧光传感体系搭建。
多重荧光成像体系开发，与 FAM、Cy3、Cy7 标记底物搭配做多色同步观测。

第四段：储存条件与注意事项

储存条件：冻干品 - 20 ℃密封避光保存，干燥分装，减少反复开盖；复溶后的蛋白溶液分装冻存于 - 80 ℃避光，避免多次冻融；远离强光、紫外、高浓度变性剂；缓冲体系避免强氧化剂，防止染料漂白、蛋白氧化。注意事项：该产物属于荧光标记重组蛋白，粉末避免吸入，复溶、移取操作轻柔，佩戴丁腈手套；含蛋白、染料废液按生物蛋白类危废密封收集处置；实验全程避光；使用前检测标记效率，长时间存放后需验证 DNA 结合活性；还原剂、高浓度去污剂容易导致染料脱落、蛋白失活；仅限体外科研实验，不用于活体给药。

西安齐岳生物科技有限公司坐落于西安，深耕科研试剂领域，为国内外科研机构、医药企业提供材料与生化产品及定制合成服务。