Alexa Fluor555-GSL II,AF555-Griffonia Simplicifolia Lectin II;AF555-GSL II 怎么用?实验室配制与标记要点(Alexa Fluor 488 的转铁蛋白) szthrk.cn

由陕西新研博美生物科技整理提供

Alexa Fluor 555标记的简单柱前草凝集素II(GSL II)是糖链研究和细胞表面分子定位中常用的荧光标记工具。它将植物凝集素对特定糖基序列的高亲和力与AFL555橙光染料的光稳定性结合在一起,在活细胞成像和固定组织染色中信号清晰、背景低,属于糖生物学实验室里出场率很高的那类试剂。

AF555-GSL II 基础参数

英文名:Alexa Fluor 555-GSL II / Alexa Fluor 555-Griffonia Simplicifolia Lectin II

中文名:Alexa荧光555-简单柱前草凝集素II / Alexa荧光555-简单柱前草凝集素II

纯度:95%

保存方式:-20℃干燥避光密封存放

实验室:陕西新研博美生物科技

AF555-GSL II 有什么理化优势

AFL555染料光漂白速率极低,同一视野内连续激发200次后荧光强度衰减不到10%,做活细胞时间序列成像时不必频繁提高激光功率来补偿信号,长时间拍摄下背景依然干净。

555 nm激发对应575 nm发射,落在橙光通道,与488 nm绿光和633 nm远红的光谱重叠区很窄,做三通道以上多色共标记时串色幅度可控,无需额外设空白对照来排除荧光交叉。

AF555-GSL II 能做哪些实验

活细胞表面糖链直接标记与定位:GSL II特异性识别含Galβ1→4GlcNAc等糖基序列,把AF555-GSL II工作液与贴壁细胞共孵育30 min,加PBS洗涤两步后直接上机,荧光显微镜下即可看到糖链在质膜上的空间分布,全程不固定、不加抗体。

组织切片糖基化组学预筛:对FFPE或冰冻切片滴加AF555-GSL II染色15-20 min,用DAPI复染细胞核,快速比较不同处理组或不同组织区域之间糖链表达的差异,为后续免疫组化或靶向质谱提供定位参考和取材依据。

AF555-GSL II 配制要注意什么

工作液以PBS含0.1% BSA为溶剂,GSL II终浓度一般取5-20 μg/mL;若目标糖链被蛋白覆盖需要暴露,可先用0.01 μg/mL Proteinase K处理10 min再滴加凝集素,酶浓度别超过0.05 μg/mL,高了之后膜骨架被啃掉,非特异结合背景会明显抬头。

AF555对光敏感,从-20℃冰箱取出到配液结束全程在暗盒或铝箔遮光下操作;配好的工作液当天用完,分装时按单次实验量(100-200 μL)装小管冻存,反复冻融不超过3次,解冻后4 h内必须用完,超时信号强度会肉眼可见地掉。

同系列相关产品

Alexa Fluor 488-GSL II

Alexa Fluor 647-GSL II

Alexa Fluor 555-MAA(刀豆蛋白凝集素)

Alexa Fluor 488-MAA

Alexa Fluor 555-PNA(豌豆凝集素)

Alexa Fluor 647-PNA

Alexa Fluor 488-WGA(小麦胚凝集素)

Alexa Fluor 555-WGA

Alexa Fluor 488-VVA(扁豆凝集素)

Alexa Fluor 555-VVA

Alexa Fluor 647-VVA

Alexa Fluor 555-DBA(大麻凝集素)

Alexa Fluor 488-DBA

Alexa Fluor 555-AFA(美洲商陆凝集素)

Alexa Fluor 647-AFA

根据目标糖链类型和现有共聚焦通道配置选对应凝集素与荧光素组合,多色实验时尽量把各荧光素发射峰拉开60 nm以上间距,串色会小很多。

以上内容由编辑LL整理,内容仅供学习参考,相关参数、具体数值请以产品官网公示信息为准,该试剂仅用于科学研究,不可用于临床诊断、治疗等其他用途。