
DBCO PEG NHS/Amine/COOH西安凯新生物科技定制的这三类试剂都属于 DBCO-PEG 双功能点击化学试剂,但 NHS、Amine、COOH 末端反应性不同,且 PEG 链长不同会导致 CAS、分子式、分子量不同。
1.DBCO-PEG-NHS
中文名:二苯并环辛炔聚乙二醇活性酯,二苯并环辛炔 PEG 活性酯
英文名:DBCO PEG NHS
2.DBCO-PEG-Amine
中文名:二苯并环辛炔聚乙二醇氨基,二苯并环辛炔 PEG 氨基
英文名:DBCO-PEG-Amine,DBCO-PEG-NH2
3.DBCO-PEG-COOH
中文名:二苯并环辛炔聚乙二醇羧酸,二苯并环辛炔 PEG 羧酸
英文名:DBCO-PEG-COOH,DBCO-PEG-Acid

DBCO PEG NHS/Amine/COOH反应有哪些注意事项:
这三类试剂的共同关键是:DBCO-PEG-NHS 对水敏感,必须现配现用;DBCO-PEG-Amine 和 DBCO-PEG-COOH 相对稳定,但反应前需正确活化或配对;DBCO 与叠氮反应时避免含叠氮钠的缓冲液;所有试剂均应 -20°C 避光、干燥、分装保存。
一、DBCO-PEG-NHS 的注意事项
1.极易水解:NHS 酯遇水会快速水解失活,固体和储备液都应保持干燥,工作液现配现用。
2.溶剂选择:先用无水 DMSO 或 DMF 配成高浓度储备液,再滴加到水相反应体系中。
3.缓冲液限制:偶联反应需在 pH 7.2–8.5 进行,避免使用 Tris、甘氨酸等含伯胺缓冲液,否则会与目标分子竞争 NHS 酯。
4.反应时间控制:NHS 酯在水相中不宜久置,通常室温反应 30 分钟至 2 小时即可,时间过长水解增加。
5.淬灭与纯化:反应后需用伯胺淬灭未反应 NHS 酯,并通过透析、脱盐柱或 SEC 去除游离试剂。
6.避免叠氮钠:若后续还要进行 DBCO-叠氮点击反应,缓冲液中不能含叠氮钠,否则会提前消耗 DBCO。
二、DBCO-PEG-Amine 的注意事项
1.氨基反应对象:末端伯胺可与 NHS 酯、活化羧基、醛基等反应,常用于进一步偶联荧光染料、生物素或羧基分子。
2.避免含胺缓冲液:若用 NHS 酯或活化羧基与 DBCO-PEG-Amine 偶联,缓冲液中不能有游离伯胺,否则会被竞争消耗。
3.pH 控制:酰胺化反应通常在中性至弱碱性条件下进行,强酸强碱会影响氨基反应活性。
4.DBCO 保护:DBCO 对光、氧和强氧化剂较敏感,反应和储存过程中应避光、避免强氧化环境。
5.后续点击反应:引入 DBCO 后,可与叠氮修饰分子在 PBS/HEPES 中室温进行 SPAAC 反应,无需铜催化。
三、DBCO-PEG-COOH 的注意事项
1.不能直接与氨基反应:羧基需经 EDC/NHS 等缩合剂活化后才能与伯胺形成酰胺键。
2.活化后尽快使用:EDC/NHS 活化生成的活性酯在水相中不稳定,应现活化、现偶联。
3.缓冲液选择:活化与偶联阶段避免含伯胺缓冲液;点击反应阶段可用 PBS 或 HEPES。
4.pH 范围:酰胺化通常在 pH 7–8.5 进行,DBCO-叠氮点击反应一般在 pH 7–9 进行。
5.空间位阻考虑:修饰大分子或纳米材料时,PEG 链长会影响偶联效率和点击反应可及性。
四、DBCO-叠氮点击反应的共同注意事项
1.无需铜催化剂,但应避免重金属离子和强氧化剂。
2.缓冲液中不能含叠氮钠,否则会与 DBCO 发生非预期点击反应。
3.反应通常在室温、中性缓冲液中进行,时间可从 30 分钟到数小时,视浓度和底物而定。
4.反应后建议通过透析、超滤或凝胶过滤去除未反应试剂。
五、西安凯新生物科技MISS,WU储存与安全:
1.固体和储备液建议 -20°C 避光、干燥、密封保存,小份分装,避免反复冻融。
2.开瓶前应先回温至室温,防止吸潮导致 NHS 酯水解或氨基质子化。
3.仅用于科研,不建议直接用于临床或人体应用。













